Nadväzuje na činnosť Matice slovenskej, ktorá je spätá aj s výskumom literatúry a literárneho života na Slovensku. V obsiahlej zbierke patria k najcennejším exponátom súbor faksimile rukopisných a knižných unikátov nachádzajúcich sa mimo územie Slovenskej republiky, ďalej súbor pamiatok z prvého obdobia Matice slovenskej (Memorandum národa slovenského, spolok Živena) ako aj viaceré osobné knižnice významných slovenských spisovateľov a dejateľov. Múzeum venuje pozornosť aj zhromažďovaniu obrazov, plastík, ilustrácií, drobných kresieb, scénografík a bábok. Súčasťou je aj Národný cintorín v Martine, Galéria literatúry a umenia, audiovizuálna sieň a libreso. Počas letných mesiacov sa na nádvorí usporadúvajú koncerty a umelecko – vzdelávacie podujatia. Múzeum vydáva aj svoju špeciálnu ročenku. Reprezentatívna trvalá expozícia je umiestnená v historickej, renesančnej budove prvej Matice slovenskej z polovice 19. stor. Obsahovo je členená do 12 tém, ktoré korešpondujú s historickými medzníkmi: Národná dvorana, Veľkomoravská ríša, Osvietenstvo, Realizmus... Vysunutou expozíciou je Múzeum Alexandra Sergejeviča Puškina, Partizánske – Brodzany.
